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【原理】
Moore氏(1968)提出保护半胱氨酸不受大气氧化作用的重要性,根据这个设想在培养基中加入抗坏血酸、硫乙醇酸或二硫基赤鲜醇(Dithiothreitol)能保护半胱氨酸不被氧化
【成分】
新蛋白胨
1g
酵母浸膏
0.5g
蛋白溶解的肝浸膏
0.5g
葡萄糖
1g
琼脂
2g
盐溶液
0.5ml
无菌脱纤维血液
10ml
蒸馏水
100ml
【制法】
(1)盐溶液:MgSO4·7H2O 40g,MnSO4·4H2O 2g,FeCl2(无水)0.4g,浓盐酸0.5g,蒸馏水1000ml,摇匀溶解;
(2)基础培养基:将新蛋白胨、酵母浸膏溶解于50ml水中,加入盐溶液,调整至pH7.6~7.8。将此液与溶化的琼脂(50ml水中溶解2g琼脂)混合,摇匀分装小瓶,每瓶18ml,(112℃,20分钟),于4℃保存、备用;
(3)还原溶液:盐酸半胱氨酸120mg,二硫基赤鲜醇120mg,谷氨酰胺60mg,蒸馏水10ml,将上述成分混合溶解调整至pH7.6~7.8,过滤除菌;
(4)培养基的制备:将18ml基础培养基溶化,冷至50℃加脱纤维血液2ml和还原溶液0.15ml,轻轻摇匀,立即倾注于平皿中,备用。
【用途】
本培养基有助于B~D型诺维氏芽孢梭菌和C~D型肉毒芽孢梭菌的生长。
【注意事项】
还原溶液必须在临用前新鲜配制。在培养基倾注和接种过程中,半胱氨酸氧化非常迅速。
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